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饲料酵母中贴壁细胞的保存方法

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饲料酵母中贴壁细胞的保存方法

发布日期:2021-08-30 00:00 来源:http://www.hbxdsw.com 点击:

1、观察细胞状态:饲料酵母贴壁细胞密度达到80%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态。细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液。


2、细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化。


3、细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min。细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存。


饲料酵母


4、细胞保藏:饲料酵母冻存管做好标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。微生物发酵饲料的作用主要体现在两个方面,一是利用廉价的农业和轻工副产物生产高质量的饲料蛋白原料,二是获得高活性的有益微生物。


这些微生物制品的应用,一方面可以提高饲料的转化率,促进畜禽生长,另一方面可以调节动物的微生态平衡,提高动物的健康水平。还有一些活菌剂可以用于治疗动物疾病。在水产动物养殖中推广应用微生物饲料酵母,可以减少抗菌素的使用,有利于生产安全食品,提高产品出口的竞争力。



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