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纯种饲料酵母的扩大培养

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纯种饲料酵母的扩大培养

发布日期:2019-06-17 00:00 来源:http://www.hbxdsw.com 点击:

    纯种饲料酵母的扩大培养:

    1、原菌种保存

    取澄清葡萄汁(或麦芽汁),调整糖的浓度为12%-14%pH5-6,加2%-2.5%琼脂,加热90-95℃融化,分装于预先洗净、干热杀菌的试管中,每管装量以制成斜面后约占试管长度的1/3为宜,塞上棉塞,每天在100℃下杀菌30-40分钟,重复三天。杀菌后,乘热制成斜面,冷凝后置于28-30℃恒温箱中。若无杂菌繁殖,可移植原菌在无菌操作下,将原菌移植于固体培养基斜面上,在28-30℃恒温下培养3天,待菌体繁殖好以后,取出放10℃以下可保存三个月备用。三个月以后,再重新移植培养,以免菌种衰老变异。

    2、酵母活化

    酵母的活化是在将酵母接入发酵罐之前恢复酵母活性。将处于休眠干化状态的酵母予以有效激活和保护,不仅是成功进行酵母活化,和接种的必要措施,也是发挥酵母最大潜能以实现酒精发酵的基础和保障。在酵母活化时,可按250300g/t汁的比例添加GofermGofermProtect,既可以很好地激活酵母细胞,又可以及时强化和保护,由于长期干化而脆弱的酵母细胞壁,同时给酵母细胞提供活化所需的全面营养元素,从而保障酵母在接入发酵罐时的高成活率、高活力和处在健康状态。此外,需要注意的是,由于铵盐类营养剂(如DAP等)在高浓度情况下对酵母存在毒害作用,所以在酵母活化过程中切勿使用此类营养剂。

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    3、一级培养

    一级培养即酵母菌的接种。将活化好的酵母菌接种于葡萄汁(或麦芽汁)中,依次进行二级培养、三级培养和酒母桶的培养。接种饲料酵母时注意卫生要求,葡萄汁(或麦芽汁)在接种前需经高温或高压的无菌处理,避免杂菌的污染。按照工艺要求确定活化酵母菌的接种量和接种温度。将新鲜葡萄汁分装于经洗净、干热杀菌的大试管或10毫升的三角瓶中,装量为10-20毫升(试管)50毫升(三角瓶),塞棉塞后,在0.6-1.0公斤/厘米2压力下杀菌30分钟,冷至常温,在无菌操作下,接入酵母菌1-2针,摇动葡萄汁,使菌体分散。在25-28℃恒温下培养24-48小时,发酵旺盛时,可供二级培养用。

    4、二级培养

    用清洁、干热杀菌的三角瓶(100毫升)盛装新鲜葡萄汁500-600毫升,加棉塞后进行杀菌,杀菌条件同一级培养。冷却后,接入培养的旺盛发酵的试管酵母液二支或三角瓶酵母液一瓶。25-28℃恒温培养20-24小时,待泡沫上升至最高又开始下降时,供下一级培养用。

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    5、三级培养

    用清洁、消毒的卡氏罐或l-1.5万毫升的大玻瓶盛装新鲜葡萄汁至瓶子容积的70%,杀菌方法同前。接种在无菌室内进行,先用70%的酒精消毒瓶口,然后接二级培养的菌种,接种量为培养液的2%-5%,在25-28℃恒温条件下培养24-48小时,繁殖旺盛时,供再扩大培养用。

    6、酒母桶培养

    酒母桶使用前进行消毒,将果汁自入口进人桶,装量约为桶容积的80%,关闭入口,放开蒸汽阀以加热果汁进行杀菌,温度达85℃,保持数分钟,即换冷水将果汁冷却到32℃左右,开定向开关,将果汁放入桶。接种时,由接种口接入大玻瓶的旺盛发酵的饲料酵母2%-5%,接种后安上发酵栓,打开定向开关通入过滤空气进行培养。一天后酒母即成熟,由酒母放出口放出3/4-2/3的酒母供生产用,留下1/4-1/3的酒母再放入桶中的已消毒的果汁进行培养。酒母桶可循环使用,只要培养的酒母健康无杂菌感染可连续使用下去,如果有杂菌感染或酵母衰弱,必须重新接种培养。

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